3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella MDA2SAL96, 96 tests, 1 ea Instrukcja obsługi

Strona jest ładowana ...

(Polski)

PL

1

3

Data wydania: 2019-05

Informacje o produkcie

Molekularny test 3M™ do wykrywania 2 – Salmonella

Opis i przeznaczenie produktu

Molekularny test 3M™ do wykrywania 2 – Salmonella stosuje się razem z Systemem 3M™ do diagnostyki molekularnej

w celu szybkiego i swoistego wykrywania bakterii Salmonella w próbkach pochodzących z przednamnożonego pokarmu,

paszy oraz środowiska przetwarzania żywności.

Molekularny test 3M™ do wykrywania wykorzystuje metodę pętlowej amplikacji izotermicznej do szybkiego namnażania

sekwencji kwasów nukleinowych z zachowaniem wysokiej swoistości i czułości, w połączeniu z bioluminescencją

do wykrywania amplikacji. Domniemane wyniki dodatnie przekazuje się w czasie rzeczywistym, zaś wyniki ujemne

wyświetlą się po zakończeniu testu. Domniemane wyniki dodatnie wymagają potwierdzenia preferowaną metodą lub

metodą wynikającą z lokalnych przepisów

(1, 2, 3)

.

Molekularny test 3M do wykrywania 2 – Salmonella jest przeznaczony do stosowania w środowisku laboratoryjnym przez

specjalistów przeszkolonych w zakresie praktyk laboratoryjnych. Firma 3M nie udokumentowała zastosowania tego

produktu w gałęziach przemysłu innych niż żywność i napoje. Przykładowo rma 3M nie udokumentowała zastosowania

tego produktu do badania próbek leków, kosmetyków, próbek klinicznych ani weterynaryjnych. Molekularnego testu

3M do wykrywania 2 – Salmonella nie oceniono w przypadku wszystkich możliwych produktów spożywczych, procesów

przetwarzania żywności, protokołów testowych ani w przypadku wszystkich dostępnych szczepów bakterii.

Podobnie jak w przypadku wszystkich metod testowych, pochodzenie, skład i jakość podłoża przednamnażającego

może mieć wpływ na otrzymywane wyniki. Czynniki takie jak metody pobierania próbek, protokoły przeprowadzania

badań, przygotowanie próbki, postępowanie i techniki laboratoryjne również mogą wpłynąć na wynik badania. Firma

3M zaleca ocenę metody wykorzystującej podłoże przednamnażające w środowisku użytkownika przy zastosowaniu

wystarczającej liczby próbek konkretnej żywności oraz próbek problematycznych pod względem rozwoju drobnoustrojów

w celu zapewnienia, że dana metoda spełnia potrzeby użytkownika.

Firma 3M dokonała oceny Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella z zastosowaniem buforowanej wody

peptonowej wg (BPW) wg ISO.

Urządzenie 3M™ do diagnostyki molekularnej należy stosować z próbkami poddanymi obróbce cieplnej na etapie lizy,

której zadaniem jest zniszczenie organizmów obecnych w próbce. Próbki, które nie przeszły odpowiedniej obróbki cieplnej

na etapie lizy, można uznać za potencjalne zagrożenie biologiczne i NIE należy ich umieszczać w Urządzeniu 3M do

diagnostyki molekularnej.

Firma 3M Food Safety została wyróżniona certykatem ISO (ang. International Organization for Standardization —

Międzynarodowa Organizacja Normalizacyjna) 9001 w zakresie projektowania i wytwarzania.

Zestaw testów Molekularny test 3M do wykrywania 2 – Salmonella zawiera 96 testów opisanych w tabeli 1.

Tabela 1. Elementy zestawu testów Molekularny test 3M do wykrywania

Element Charakterystyka Liczba sztuk Zawartość Komentarze

Roztwór lizujący

3M™ (LS)

Różowy roztwór

w przezroczystych

probówkach

96 (12 taśm

z 8 probówkami)

580 µl LS

na probówkę

Ustawione

w statywie i gotowe

do użytku

Probówki reagentowe

Molekularnego testu

3M™ do wykrywania

2 – Salmonella

Zielone probówki 96 (12 taśm

z 8 probówkami)

Liolizowana swoista

mieszanina do

amplikacji

i wykrywania

Gotowe do użycia

Dodatkowe korki Zielone korki 96 (12 taśm

z 8 korkami)

Gotowe do użycia

Kontrola 3M™

reagenta (RC)

Przezroczyste

probówki z korkiem

zatrzaskowym

16 (2 woreczki po 8

oddzielnych probówek)

Liolizowane DNA

kontrolne, mieszanina

do amplikacji

i wykrywania

Gotowe do użycia

Skrócona

instrukcja obsługi

1

Kontrola ujemna (NC), niebędąca częścią zestawu, to jałowe podłoże przednamnażające, np. BPW wg ISO. Nie stosować

wody jako NC.

(Polski)

PL

2

Bezpieczeństwo

Użytkownik powinien dokładnie zapoznać się ze wszystkimi informacjami dotyczącymi bezpieczeństwa zawartymi

w instrukcji dotyczącej Systemu 3M do diagnostyki molekularnej oraz Molekularnego testu 3M do wykrywania

2 – Salmonella i się do nich stosować. Instrukcję bezpieczeństwa należy zachować do przyszłego wykorzystania.

OSTRZEŻENIE: Oznacza niebezpieczną sytuację, której skutkiem, wrazie braku podjęcia środków

zapobiegawczych, mogą być poważne obrażenia ciała lub śmierć i/lub uszkodzenie mienia.

WAŻNA INFORMACJA: Oznacza potencjalnie niebezpieczną sytuację, której skutkiem, wrazie niepodjęcia środków

zapobiegawczych, może być uszkodzenie mienia.

W OSTRZEŻENIE

Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella nie należy stosować do diagnozowania stanu zdrowotnego

ludzi ani zwierząt.

Obowiązkiem użytkownika jest przeszkolenie personelu w zakresie aktualnych, odpowiednich technik badań:

na przykład w zakresie dobrych praktyk laboratoryjnych, norm ISO/IEC 17025

(4)

lub ISO 7218

(5)

.

Aby zmniejszyć ryzyko związane z wynikiem fałszywie ujemnym prowadzącym do wydania zanieczyszczonego

produktu:

• Należy postępować zgodnie z protokołem i wykonywać testy zgodnie z zaleceniami podanymi w Informacjach

o produkcie.

• Molekularny test 3M do wykrywania 2 – Salmonella należy przechowywać w sposób podany na opakowaniu

i w Informacjach o produkcie.

• Molekularny test 3M do wykrywania 2 – Salmonella należy stosować wyłącznie przed upływem terminu ważności.

• Molekularny test 3M do wykrywania 2 – Salmonella należy stosować w odniesieniu do próbek żywności, paszy

i środowiska przetwarzania żywności poddanych walidacji wewnętrznej lub przez osoby trzecie.

• Molekularny test 3M do wykrywania 2 – Salmonella należy stosować wyłącznie w połączeniu z powierzchniami,

środkami odkażającymi, protokołami i szczepami bakterii poddanymi walidacji wewnętrznej lub przez osoby trzecie.

• W przypadku próbki środowiskowej zawierającej bufor neutralizujący z kompleksem sulfonianu arylu przed

rozpoczęciem badania należy przygotować roztwór rozcieńczony w stosunku 1:2 (1 część próbki w 1 części jałowego

bulionu przednamnażającego). Inną możliwością jest przeniesienie 10 µl przednamnażającego buforu neutralizującego

do probówek z roztworem lizującym 3M. Produkty rmy 3M™ do postępowania z próbkami, które zawierają bufor

neutralizujący z kompleksem sulfonianu arylu: BPPFV10NB, RS96010NB, RS9604NB, SSL10NB, SSL10NB2G, HS10NB,

HS10NB2G i HS2410NB2G.

Aby zmniejszyć ryzyko związane z narażeniem na substancje chemiczne i zagrożenia biologiczne:

• Badania patogenów należy prowadzić w odpowiednio wyposażonym laboratorium pod kontrolą przeszkolonego

personelu. Inkubowane podłoże do przednamnażania oraz sprzęt lub powierzchnie, które mogły mieć kontakt

z inkubowanym podłożem do przednamnażania, mogą zawierać patogeny na poziomie zagrażającym ludzkiemu zdrowiu.

• Należy zawsze przestrzegać standardowych laboratoryjnych praktyk bezpieczeństwa, łącznie z noszeniem

odpowiedniej odzieży i okularów ochronnych przy pracy z reagentami i skażonymi próbkami.

• Należy unikać kontaktu z zawartością probówek z podłożem przednamnażającym oraz reagentem po amplikacji.

• Przednamnożone próbki należy utylizować zgodnie zobowiązującymi normami branżowymi.

• Próbki, które nie przeszły odpowiedniej obróbki cieplnej na etapie lizy, można uznać za potencjalne zagrożenie

biologiczne i NIE należy ich umieszczać w Urządzeniu 3M do diagnostyki molekularnej.

Aby zmniejszyć ryzyko związane z zanieczyszczeniem krzyżowym podczas przygotowania testu:

• Należy zawsze nosić rękawiczki (aby chronić użytkownika i zapobiegać wprowadzaniu nukleaz).

Aby ograniczyć ryzyko związane z zanieczyszczeniem środowiska:

• Należy postępować zgodnie z bieżącymi normami branżowymi dotyczącymi utylizacji zanieczyszczonych odpadów.

Aby zmniejszyć ryzyko związane z narażeniem na gorące płyny:

• Nie przekraczać zalecanych ustawień temperatury w bloku grzewczym.

• Nie przekraczać zalecanego czasu ogrzewania.

• Stosować odpowiedni, skalibrowany termometr do potwierdzenia poprawności temperatury Wkładki 3M™ bloku

grzewczego do diagnostyki molekularnej (np. termometr zanurzeniowy zanurzany częściowo lub cyfrowy termometr

z termoogniwem, ale nie termometr zanurzeniowy zanurzany całkowicie). Termometr należy umieścić w wyznaczonym

miejscu Wkładki 3M bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej.

(Polski)

PL

3

WAŻNA INFORMACJA

Aby zmniejszyć ryzyko związane z zanieczyszczeniem krzyżowym podczas przygotowania testu:

• Zmienić rękawiczki przed nawodnieniem probówek reagentowych.

• Zaleca się stosowanie jałowych końcówek pipet do biologii molekularnej z (ltrowaną) barierą aerozolową.

• Do przeniesienia każdej próbki używać nowej końcówki pipety.

• Przy przenoszeniu przednamnożonych próbek do probówki lizującej należy przestrzegać zasad dobrej praktyki

laboratoryjnej. Aby uniknąć skażenia pipetora, użytkownik może zdecydować się dodać etap transferu pośredniego.

Przykładowo można przenieść przednamnożoną próbkę do jałowej probówki.

• W miarę możliwości należy używać stanowiska badawczego biologii molekularnej z lampą bakteriobójczą. Należy

okresowo dezynfekować stoły i sprzęt laboratoryjny (pipety, narzędzia do zakładania/zdejmowania korków itp.)

za pomocą 1–5% (obj./obj., wodnego) roztworu domowego wybielacza lub roztworu do usuwania DNA.

Aby ograniczyć ryzyko związane z wynikiem fałszywie dodatnim:

• Nie otwierać probówek po procesie amplikacji.

• Zanieczyszczone probówki należy utylizować, namaczając je w 1–5% (obj./obj., wodnym) roztworze domowego

wybielacza przez 1 godzinę i wynosząc poza obszar przygotowania testów.

• Nie umieszczać probówek reagentowych w autoklawie po procesie amplikacji.

Dodatkowe informacje oraz lokalne przepisy dotyczące utylizacji zawiera karta charakterystyki produktu.

W przypadku pytań dotyczących konkretnych zastosowań lub procedur należy odwiedzić stronę

www.3M.com/foodsafety lub skontaktować się z lokalnym przedstawicielem lub dystrybutorem rmy 3M.

Obowiązki użytkownika

Użytkownicy są zobowiązani do zapoznania się z instrukcjami oraz informacjami dotyczącymi produktu. W celu uzyskania

dalszych informacji należy odwiedzić stronę internetową www.3M.com/foodsafety lub skontaktować się zlokalnym

przedstawicielem lub dystrybutorem rmy 3M.

Przy wyborze metody testowania należy pamiętać, że takie czynniki zewnętrzne, jak metody próbkowania, protokoły

testowania, przygotowanie próbki, dalsze postępowanie, technika laboratoryjna oraz sama próbka mogą wpływać na

uzyskiwane wyniki.

Obowiązkiem użytkownika przy wyborze jakiejkolwiek metody testowania lub produktu jest poddanie ocenie dostatecznej

liczby próbek z właściwymi macierzami i z uwzględnieniem zagrożeń powodowanych przez mikroorganizmy, tak aby

zastosowana metoda mogła spełnić oczekiwania użytkownika i ustalone przez niego kryteria.

Obowiązkiem użytkownika jest również dopilnowanie, aby zastosowane metody testowania i uzyskane wyniki spełniały

wymagania klienta i dostawcy.

Podobnie jak w przypadku każdej metody testowania wyniki uzyskiwane za pomocą produktu rmy 3M Food Safety nie

stanowią gwarancji jakości testowanych macierzy ani procesów.

Aby pomóc klientom ocenić metodę dla różnych typów macierzy spożywczych, rma 3M opracowała zestaw Kontroli

3M™ macierzy do diagnostyki molekularnej. W razie potrzeby należy użyć zestawu Kontroli macierzy (MC) do ustalenia,

czy dana macierz może wpływać na wyniki Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella. Należy przetestować

kilka próbek reprezentatywnych dla danej macierzy, czyli na przykład próbki pozyskane z różnych źródeł, podczas

dowolnego okresu walidacji przy stosowaniu metody rmy 3M, a także podczas testowania nowych lub nieznanych

macierzy albo macierzy, które zostały poddane zmianom (w zakresie procesowym lub surowcowym).

Macierz można zdeniować jako typ produktu o nieodłącznych właściwościach, takich jak skład i proces wytwarzania.

Różnice pomiędzy macierzami mogą być łatwo zauważalne, jak np. efekty spowodowane różnicami w procedurach

obróbki lub prezentacji, przykładowo surowe lub pasteryzowane, świeże lub suszone itd.

Wyłączenia gwarancji / Ograniczone środki zaradcze

JEŚLI NIE ZOSTAŁO TO WYRAŹNIE OKREŚLONE W ROZDZIALE DOT. OGRANICZONEJ GWARANCJI

POJEDYNCZYCH OPAKOWAŃ PRODUKTÓW, FIRMA 3M WYŁĄCZA WSZELKIE GWARANCJE WYRAŹNE

I DOROZUMIANE, W TYM MIĘDZY INNYMI WSZELKIE GWARANCJE ZGODNOŚCI Z PRZEZNACZENIEM

I PRZYDATNOŚCI DO OKREŚLONEGO CELU. W razie wad jakiegokolwiek produktu rmy 3M Food Safety rma 3M lub

jej autoryzowany dystrybutor wymieni taki produkt lub, wedle własnego uznania, zwróci koszty zakupu tego produktu.

Są to jedyne przysługujące środki zaradcze. W ciągu 60 dni od wykrycia jakiejkolwiek podejrzewanej wady produktu

należy niezwłocznie powiadomić rmę 3M oraz zwrócić produkt. W celu uzyskania informacji na temat procedury zwrotu

towarów (RGA) należy skontaktować się z biurem obsługi klienta (1-800-328-1671 na terenie USA) lub z ocjalnym

przedstawicielem ds. bezpieczeństwa żywności rmy 3M.

(Polski)

PL

4

Ograniczenie odpowiedzialności rmy 3M

FIRMA 3M NIE BĘDZIE ODPOWIEDZIALNA ZA JAKIEKOLWIEK SZKODY ANI STRATY, ZARÓWNO BEZPOŚREDNIE,

POŚREDNIE, SZCZEGÓLNE, UBOCZNE LUB NASTĘPCZE, W TYM MIĘDZY INNYMI ZA UTRACONE ZYSKI. W żadnym

wypadku odpowiedzialność rmy 3M z mocy prawa nie może przekroczyć ceny zakupu rzekomo wadliwego produktu.

Przechowywanie i utylizacja

Molekularny test 3M do wykrywania 2 – Salmonella należy przechowywać w temperaturze 2–8°C. Nie zamrażać. Podczas

przechowywania chronić zestaw przed światłem. Po otwarciu zestawu należy sprawdzić, czy woreczek foliowy nie

jest uszkodzony. Nie używać zestawu, jeżeli woreczek jest uszkodzony. Po otwarciu nieużywane probówki reagentowe

należy przechowywać w woreczku wielokrotnego zamknięcia z pochłaniaczem wilgoci wewnątrz, co pozwoli zachować

stabilność liolizowanych reagentów. Ponownie zamknięte woreczki można przechowywać w temperaturze 2–8°C

maksymalnie przez 60 dni.

Nie stosować Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella po upływie daty ważności. Termin ważności i numer

partii podano na zewnętrznej etykiecie pudełka. Po użyciu podłoże przednamnażające i probówki Molekularnego testu

3M do wykrywania 2 – Salmonella mogą zawierać materiały patogenne. Po zakończeniu badania należy stosować się

do aktualnych standardów branżowych dotyczących utylizacji zanieczyszczonych odpadów. Dodatkowe informacje oraz

lokalne przepisy dotyczące utylizacji zawiera karta charakterystyki produktu.

Instrukcja użycia

Należy dokładnie przestrzegać wszystkich instrukcji. Wprzeciwnym razie wyniki mogą być niedokładne.

Należy okresowo dezynfekować stoły i sprzęt laboratoryjny (pipety, narzędzia do zakładania/zdejmowania korków itp.)

za pomocą 1–5% (obj./obj., wodnego) roztworu domowego wybielacza lub roztworu do usuwania DNA.

Użytkownik powinien ukończyć szkolenie kwalikacyjne dla użytkowników Systemu 3M do diagnostyki molekularnej (OQ),

tak jak opisano to w dokumencie „Instrukcje i protokoły dotyczące wymagań instalacji (IQ) / kwalikacji operacyjnej (OQ)

Systemu 3M do diagnostyki molekularnej”

(6)

.

Szczegółowe wymagania opisano w części „Specjalne instrukcje dotyczące zatwierdzonych metod”:

Tabela 3 – protokoły przednamnażania według AOAC® Ocial Method of Analysis

SM

2016.01 oraz

AOAC® Performance Tested

SM

, certykat nr 091501.

Tabela 4 – protokoły przednamnażania zgodnie z certykatem NF VALIDATION 3M 01/16 -11/16.

Przednamnażanie próbki

W tabelach 2, 3 lub 4 można znaleźć wytyczne dotyczące ogólnych protokołów przednamnażania próbek żywności,

paszy i próbek środowiskowych.

Użytkownik ma obowiązek przeprowadzić walidację alternatywnych protokołów próbkowania lub proporcji roztworów,

aby sprawdzić, czy dana metoda badawcza spełnia kryteria określone przez użytkownika.

Żywność

1. Poczekać na zrównoważenie temperatury podłoża przednamnażającego BPW wg ISO do temperatury otoczenia

w laboratorium lub 41,5 ± 1°C w zależności od badanych macierzy. Patrz tabele 2, 3 lub 4.

2. Połączyć w warunkach aseptycznych podłoże przednamnażające i próbkę.

3. Dokładnie zhomogenizować przez zmieszanie, wytrząsanie lub mieszanie ręczne przez 2 ± 0,2 minuty lub do czasu

całkowitego rozpuszczenia wszystkich grudek i uzyskania homogenicznej zawiesiny podłoża przednamnażającego

(10-15)

.

a. W przypadku wszystkich próbek produktów mięsnych lub innych o wysokiej zawartości cząstek stałych zaleca

się stosowanie worków z ltrem.

b. W przypadku macierzy zwiększających swoją objętość pod wpływem wody i wykazujących dużą lepkość

(np. płatki śniadaniowe, skrobia), zaleca się zastosować dodatkowe rozcieńczenia (> 1:10) do momentu, aż lepkość

wystarczająco spadnie lub dodać sterylny 1% roztwór (wagowo/objętościowo) alfa-amylazy do podłoża BPW

(ISO)

(10-13)

.

c. W przypadku dużych próbek mleka w proszku i płatków śniadaniowych materiał należy powoli wprowadzać do

płynu, często go mieszając, by nie powstawały grudy.

4. Inkubować zgodnie z opisem w odpowiedniej tabeli z protokołem (patrz tabele 2, 3 i 4).

(Polski)

PL

5

Próbki środowiskowe

Urządzenia do pobierania próbek mogą być nawadniane gąbką z użyciem roztworu neutralizującego w celu

unieszkodliwienia skutków działania środków odkażających. Firma 3M zaleca stosowanie gąbki celulozowej

niezawierającej środków biobójczych. Roztworem neutralizującym może być bulion neutralizujący Dey-Engley (D/E) lub

bulion z lecytyną. Po pobraniu próbek zaleca się odkażenie otoczenia.

OSTRZEŻENIE: Gdy bufor neutralizujący z kompleksem sulfonianu arylu ma zostać użyty jako roztwór nawilżający

gąbkę, przed rozpoczęciem badania należy przygotować roztwór rozcieńczony w stosunku 1:2 (1 część próbki w

1 części jałowego bulionu przednamnażającego) przednamnożonej próbki środowiskowej, aby zmniejszyć ryzyko

związane z wynikiem fałszywie ujemnym prowadzącym do wydania zanieczyszczonego produktu. Inną możliwością jest

przeniesienie 10 µl przednamnażającego buforu neutralizującego do probówek z roztworem lizującym 3M.

Zalecany rozmiar obszaru próbkowania do werykacji obecności lub braku patogenu na powierzchni wynosi co najmniej

100 cm

2

(10 cm x 10 cm lub 4” x 4”). W przypadku próbkowania za pomocą gąbki należy pokryć cały obszar

w dwóch kierunkach (od strony lewej do prawej, a następnie z góry do dołu) lub pobrać próbki środowiskowe zgodnie

z obowiązującym protokołem próbkowania lub według wytycznych FDA BAM

(1)

, USDA FSIS MLG

(2)

lub ISO 18593:2018

(7)

.

Użytkownik ma obowiązek przeprowadzić walidację alternatywnych protokołów próbkowania lub proporcji roztworów,

aby sprawdzić, czy dana metoda badawcza spełnia kryteria określone przez użytkownika.

1. Wstępnie ogrzać podłoże do przednamnażania BPW wg ISO do temperatury 41,5 ± 1°C w zależności od badanych

macierzy. Patrz tabele 2, 3 lub 4.

2. Połączyć w warunkach aseptycznych podłoże przednamnażające i próbkę. Dokładnie zhomogenizować przez

zmieszanie, wytrząsanie lub mieszanie ręczne przez 2 ± 0,2 minuty. Inkubować zgodnie z opisem w odpowiedniej

tabeli z protokołem. Patrz tabele 2, 3 lub 4.

Tabela 2. Ogólne protokoły przednamnażania.

Macierz próbki

Wielkość

próbki

Objętość bulionu

przednamnażającego

Temperatura

przednamnażania

(±1°C)

Czas

przednamnażania

(godz.)

Objętość

analizowanej

próbki (μl)

(a)

Protokół 1

Przetworzone produkty

spożywcze (z wyjątkiem

proszków jajecznych oraz

produktów określonych

w innych protokołach)

(b)

25 g 225 ml BPW wg ISO 37 18–26 20

Protokół 2

Surowa i nieprzetworzona

żywność, proszki jajeczne,

pasza dla zwierząt oraz

próbki środowiskowe

(c)

25 g

225 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 18–26 20

Protokół 3

Sproszkowane produkty

mleczne (włącznie

z pokarmem dla niemowląt

i sojowym pokarmem

dla niemowląt)

25 g 225 ml BPW wg ISO 37 20–26 20

Protokół 4

Produkty kakaowe

(proszek, czekolady,

wyroby cukiernicze itp.)

25 g

225 ml sterylnego

odtłuszczonego mleka

w proszku 100g/l

z 0,002% zieleni

brylantynowej

(d,e,f)

37 24–30 20

Protokół 5

Pozostałe produkty,

takie jak: przyprawy,

zioła aromatyczne,

koncentraty, herbaty

i kawy rozpuszczalne,

kostki rosołowe

25 g

235 ml 2X BPW

wg ISO z 0,5%

roztworem K

2

SO

3

+

240ml sterylnego

odtłuszczonego mleka

w proszku 100g/l

(d,g,h)

37 24–30 10

(Polski)

PL

6

Protokół 6

Orzechy włoskie lub

mieszanki orzechów

zawierające orzechy

włoskie (ten protokół jest

odpowiedni dla innych

orzechów, w tym orzechów

pekan, migdałów,

pistacji, orzechów

nerkowca, kasztanów,

orzechów makadamia,

orzechów brazylijskich,

orzeszków sojowych oraz

orzeszków ziemnych)

25 g

225 ml sterylnego

odtłuszczonego mleka

w proszku 100g/l

(d,h)

37 18–24 20

(a) Objętość próbki przenoszona do probówek z roztworem lizującym. Patrz krok 4.7 w części Liza.

(b) Przykłady produktów badanych za pomocą protokołu 1: posiłki gotowe do spożycia, sałatki, sos angielski.

(c) Przykłady produktów badanych za pomocą protokołu 2: surowe mięso, mrożone warzywa, wszystkie sery,

sfermentowane mleko, surowa sałatka (sałata, Batavia).

(d) Odtłuszczone mleko w proszku można zastąpić odtłuszczonym mlekiem UHT.

(e) 0,45 ml 1% wodnego roztworu zieleni brylantynowej na 225 ml odtłuszczonego mleka, co skutkuje uzyskaniem

roztworu zieleni brylantynowej o stężeniu końcowym 0,002% (0,02 g/l).

(f) Aby przygotować sterylne odtłuszczone mleko w proszku, należy zawiesić 100 g odwodnionego odtłuszczonego

mleka w proszku w 1 l wody destylowanej lub oczyszczonej. Mieszać do momentu rozpuszczenia. Umieścić

w autoklawie na 15 minut w temperaturze 121°C. Przechowywać w temperaturze 2–30°C

(8)

.

(g) 5 g K

2

SO

3

na 1000 ml BPW wg ISO, co skutkuje uzyskaniem roztworu K

2

SO

3

o stężeniu końcowym 0,5%.

(h) 240 ml sterylnego odtłuszczonego mleka w proszku 100 g/l należy dodać do 235 ml 2X BPW wg ISO z roztworem

0,5% K

2

SO

3

.

W przypadku stosowania opcjonalnego etapu przednamnażania dodatkowego, np. z użyciem podłoża Rappaport

Vassiliadis, należy wykonać rozcieńczenie w stosunku 1:2 (1 część przednamnażanej próbki w 1 części sterylnego

bulionu przednamnażającego) lub po prostu przenieść 10 µl podłoża do przednamnażania dodatkowego do probówek

z roztworem lizującym 3M. W przypadku stosowania bulionu tetrationianowego (TT) należy przenieść 20 µl podłoża do

przednamnażania dodatkowego do probówek z roztworem lizującym 3M, przy czym nie wolno wytrząsać podłoża do

przednamnażania TT ani pipetować z dna probówki do przednamnażania, aby uniknąć przeniesienia osadów.

Specjalne instrukcje dotyczące zatwierdzonych metod

AOAC

®

Ocial Methods of Analysis

SM

2016.01

Certykat AOAC

®

Performance Tested

SM

nr #091501

W programach AOAC Research Institute OMA

SM

oraz PTM

SM

Molekularny test 3M do wykrywania 2 – Salmonella okazał

się skuteczną metodą wykrywania bakterii Salmonella. W Tabeli 3 przedstawiono macierze przetestowane w ramach

tego badania.

(Polski)

PL

7

Tabela 3. Protokoły przednamnażania zgodnie z metodą AOAC OMA

SM

2016.01 oraz AOAC PTM

SM

, certykat nr 091501.

Objętość próbki przenoszona do probówek z roztworem lizującym 3M wynosi 20µl.

Macierz próbki Wielkość próbki

Objętość bulionu

przednamnażającego

Temperatura

przednamnażania

(±1°C)

Czas

przednamnażania

(godz.)

Surowa mielona wołowina

25 g

225 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 10–24

325 g

975 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

Surowy mielony kurczak

25 g

225 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 10–24

325 g

975 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 14–24

Smażony kurczak panierowany 325 g 2925 ml BPW wg ISO 37 18–24

Sucha karma dla psów

25 g 225 ml BPW wg ISO

37 18–24

375 g 1500 ml BPW wg ISO

Pieprz czarny, surowa cała

krewetka, pakowany surowy

szpinak, pasteryzowany

przetworzony ser amerykański

25 g 225 ml BPW wg ISO 37 18–24

Płukanka z tusz kurczaka 30 ml

30 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 18–24

Gąbka do wymazów

z tusz kurczaka

1 gąbka

50 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 18–24

Błyskawiczne odtłuszczone

mleko w proszku

25 g 225 ml BPW wg ISO 37 20–24

Kakao w proszku 25 g 225 ml BPW wg ISO 37 24–28

Pasteryzowane całe jaja

w płynie

100 ml 900 ml BPW wg ISO 37 18–24

Woda irygacyjna

po kiełkowaniu

375 ml 3375 ml BPW wg ISO 37 18–24

Kremowe masło orzechowe

25 g 225 ml BPW wg ISO

37 18–24

375 g 3375 ml BPW wg ISO

Środowiskowe

Zabezpieczony beton 1 gąbka

225 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 18–24

Stal nierdzewna 1 wacik

10 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 18–24

Zabezpieczona

płytka ceramiczna

1 gąbka

50 ml BPW wg ISO

(wstępnie ogrzanego)

41,5 18–24

Macierz

próbki

Wielkość

próbki

Objętość

bulionu

przednamna-

żającego

Temperatura

przednamnażania

(± 1°C)

Czas przed-

namnażania

(godz.)

Podłoże do

przednamnażania

dodatkowego (ml)

Temperatura

przednamnażania

dodatkowego

(± 1°C)

Czas przed-

namnażania

dodatkowego

(godz.)

Surowa

krewetka,

z głową

25 g

225 ml BPW

wg ISO

37 18–24

R-V R10: 0,1ml

w 10ml

(a)

41,5 4–24

(a) Przenieść 10 µl przednamnożonej próbki do probówek z roztworem lizującym. Patrz krok 4.7 w części Liza.

(Polski)

PL

8

Certykacja NF VALIDATION instytutu AFNOR Certication

3M 01/16 -11/16

ALTERNATIVE ANALYTICAL METHODS FOR AGRIBUSINESS

http://nf-validation.afnor.org/en

Dodatkowe informacje na temat końca ważności można znaleźć w certykacie NF VALIDATION dostępnym na wskazanej

powyżej stronie internetowej.

Metoda certykowana według NF VALIDATION zgodnie z normą ISO 16140-2

(7)

w porównaniu do normy ISO 6579

(3)

.

Zakres walidacji: Wszystkie produkty żywnościowe przeznaczone dla ludzi, próbki ze środowiska produkcyjnego

(włącznie z próbkami z produkcji pierwotnej), karma i pasza dla zwierząt przez wykonanie testów walidacyjnych na

szerokiej gamie produktów spożywczych.

Przygotowanie próbki: Próbki należy przygotować zgodnie z normami EN ISO 6579

(3)

oraz EN ISO 6887

(10-15)

.

Wersja oprogramowania: Patrz certykat.

Tabela 4. Protokoły przednamnażania zgodnie z metodą certykowaną według NF VALIDATION 3M 01/16 -11/16.

Protokół

Wielkość

próbki

Objętość

bulionu przed-

namnażającego

Temperatura

przednamnażania

(+1°C)

Czas

przednamna-

żania (godz.)

Objętość

analizowanej

próbki (µl)

(a)

Protokół 1:

• Szeroka gama przetworzonych

produktów spożywczych

(z wyłączeniem proszku

jajecznego, przetwarzanych

warzyw i owoców oraz

produktów określonych

w innych protokołach)

• Wszystkie ryby i surowe

owoce morza

• Karma i pasza dla zwierząt

• Produkcja pierwotna

(bez odchodów)

25 g

225 ml BPW

wg ISO

37 18–26 20

Protokół 2:

• Szeroka gama surowej

i nieprzetworzonej żywności

(z wyłączeniem surowych ryb

i surowych owoców morza,

a także produktów określonych

w innych protokołach)

• Proszki jajeczne

• Wszystkie owoce i warzywa

• Próbki środowiskowe

z produkcji żywności

25 g,

1 szmatka

lub

1 wacik

225 ml wstępnie

ogrzanego podłoża

BPW wg ISO

41,5 18–26 20

Protokół 3:

• Sproszkowane

produkty mleczne

25 g

225 ml BPW

wg ISO

37 20–26 20

Protokół 4:

• Produkty kakaowe zawierające

ponad 20% kakao 25 g

225 ml

w odtłuszczonym

mleku UHT

+ 0,002% zieleni

brylantynowej

37 24–30 20

(Polski)

PL

9

Protokół 5:

• Przyprawy, zioła aromatyczne,

koncentraty, herbaty, kawy,

dodatki kulinarne

25 g

235 ml 2 x BPW

ISO + K

2

SO

3

0,5% + 240 ml

odtłuszczonego

mleka UHT

37 24–30 10

Protokół 6:

• Mięso surowe 25 g

225 ml wstępnie

ogrzanego podłoża

BPW wg ISO

41,5 10–24 20

Protokół 7:

• Produkcja pierwotna

(z odchodami)

1 zestaw

okładzin

na buty

100 ml w bulionie

tetrationianowym

37 22–24 20

25 g

225 ml bulionu

tetrationianowego

Protokół 8:

• Pokarm dla niemowląt, płatki

śniadaniowe dla niemowląt,

sproszkowane produkty

mleczne bez probiotyków

(b)

375 g

3375 ml wstępnie

ogrzanego podłoża

BPW wg ISO

37 20–26 20

Protokół 9:

• Pokarm dla niemowląt, płatki

śniadaniowe dla niemowląt,

sproszkowane produkty

mleczne z probiotykami

(b)

375 g

3375 ml wstępnie

ogrzanego podłoża

BPW wg ISO

+ wankomycyna

(10 mg/l)

37 20–26 20

(a) Objętość próbki przenoszona do probówek z roztworem lizującym. Patrz krok 4.7 w części Liza.

(b) W przypadku dużych próbek produktów w proszku i płatków śniadaniowych materiał należy powoli wprowadzać do

płynu, często go mieszając, by nie powstawały grudy.

UWAGI:

• Próbki o wielkości przekraczającej 25 g nie były badane w badaniu według NF VALIDATION z wyjątkiem protokołu 8 i 9.

• Krótkie protokoły detekcji są wrażliwe na warunki inkubacji. Należy stosować się do warunków temperaturowych

określonych w specykacji technicznej. Obowiązkiem użytkownika jest skontrolowanie, czy po wstępnym ogrzaniu

bulion przednamnażający osiągnie temperaturę wymaganą przed inkubacją. Czas przygotowywania próbek,

czyli opóźnienie między końcem etapu wstępnego ogrzewania bulionu przednamnażającego a początkiem

etapu inkubacji próbki żywności, nie powinien przekroczyć 45 minut. Podczas inkubacji zaleca się stosowanie

wentylowanego inkubatora.

• Podczas przenoszenia próbki z przednamnażającego bulionu tetrationianowego (TT) do probówek

z roztworem lizującym 3M nie wolno wytrząsać podłoża do przednamnażania TT ani pipetować z dna probówki

do przednamnażania, aby uniknąć przeniesienia osadów. Przeniesienie osadu może skutkować uzyskaniem

nieprawidłowych wyników.

• Zalecane momenty przerwania protokołu występują po etapie przednamnażania lub przed lizą próbki. Bulion

z przednamnożoną próbką lub próbkę lizatu można przechowywać w temperaturze 2–8°C przez maksymalnie

72 godziny. Po wyjęciu bulionu przednamnażającego z przechowywania należy wznowić testy od kroku 1 części Liza.

Po wyjęciu próbki lizatu z przechowywania należy wznowić testy od kroku 8 części Liza.

Przygotowanie Tacy 3M™ urządzenia szybkiego ładowania testów do diagnostyki molekularnej

1. Zmoczyć szmatkę lub jednorazowy ręcznik 1–5% (obj./obj., wodnym) roztworem wybielacza do użytku domowego

i przetrzeć nim Tacę 3M™ urządzenia szybkiego ładowania testów do diagnostyki molekularnej.

2. Spłukać wodą Tacę 3M urządzenia szybkiego ładowania testów do diagnostyki molekularnej.

3. Osuszyć Tacę 3M urządzenia szybkiego ładowania testów do diagnostyki molekularnej za pomocą

jednorazowego ręcznika.

4. Przed rozpoczęciem użytkowania należy sprawdzić, czy Taca 3M urządzenia szybkiego ładowania testów do

diagnostyki molekularnej jest sucha.

Przygotowanie Wkładki 3M™ bloku chłodzenia do diagnostyki molekularnej

Wkładkę 3M™ bloku chłodzenia do diagnostyki molekularnej należy umieścić bezpośrednio na blacie laboratoryjnym.

Stosować blok w temperaturze otoczenia w laboratorium (20–25°C).

Przygotowanie Wkładki 3M™ bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej

Wkładkę 3M™ bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej należy umieścić w suchym podwójnym bloku grzewczym.

Włączyć suchy blok grzewczy i ustawić temperaturę pozwalającą Wkładce 3M bloku grzewczego do diagnostyki

molekularnej osiągnąć i utrzymać temperaturę 100 ± 1°C.

(Polski)

PL

10

UWAGA: W zależności od typu bloku grzewczego Wkładkę 3M bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej należy

zostawić na około 30 minut, by osiągnęła odpowiednią temperaturę. Używając odpowiedniego, skalibrowanego

termometru (przykładowo częściowo zanurzanego termometru lub cyfrowego termometru z termoogniwem, a nie

całkowicie zanurzanego termometru) umieszczonego w wyznaczonym miejscu, sprawdzić, czy temperatura Wkładki

3M bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej wynosi 100 ± 1°C.

Przygotowanie Urządzenia 3M™ do diagnostyki molekularnej

1. Uruchomić oprogramowanie 3M™ do diagnostyki molekularnej i zalogować się. Skontaktować się z przedstawicielem

3M Food Safety, aby upewnić się, że dysponują Państwo najnowszą wersją oprogramowania.

2. Włączyć Urządzenie 3M do diagnostyki molekularnej.

3. Utworzyć lub edytować serię z danymi dla każdej próbki. Szczegółowe informacje są dostępne w instrukcji obsługi

Systemu 3M do diagnostyki molekularnej.

UWAGA: Przed włożeniem Tacy 3M urządzenia szybkiego ładowania testów do diagnostyki molekularnej z probówkami

reakcyjnymi Urządzenie 3M do diagnostyki molekularnej musi osiągnąć stan gotowości. Etap nagrzewania trwa około

20 minut i sygnalizuje go POMARAŃCZOWA kontrolka na pasku stanu urządzenia. Kiedy urządzenie będzie gotowe do

rozpoczęcia analizy, kolor paska stanu zmieni się na ZIELONY.

Liza

Za pomocą śrubokrętu lub szpatułki wyjąć dolną część stojaka z probówkami z roztworem lizującym 3M przed

umieszczeniem go we Wkładce 3M bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej.

1. Umożliwić ogrzanie probówek z roztworem lizującym 3M, pozostawiając stojak w temperaturze pokojowej

(20–25°C) na noc (16–18 godzin). Alternatywą dla równoważenia temperatury probówek z roztworem lizującym

3M do temperatury pokojowej jest pozostawienie probówek z roztworem lizującym 3M na stole laboratoryjnym na co

najmniej 2 godziny, inkubacja probówek z roztworem lizującym 3M w inkubatorze nastawionym na 37 ± 1°C przez

1 godzinę lub umieszczenie ich w suchym podwójnym bloku grzewczym na 30 sekund w temperaturze 100 ± 1°C.

2. Odwrócić probówki zamknięte korkiem w celu wymieszania ich zawartości. Przejść do następnego kroku w ciągu

4 godzin.

3. Wyjąć bulion przednamnażający z inkubatora.

4. Dla każdej próbki oraz próbki NC (sterylnego podłoża przednamnażającego) wymagana jest jedna probówka

z roztworem lizującym 3M.

4.1 Taśmy z probówkami z roztworem lizującym 3M można dociąć do żądanej liczby probówek z roztworem lizującym

3M. Zależnie od sytuacji należy dobrać liczbę pojedynczych probówek z roztworem lizującym 3M lub taśm

złożonych z 8 probówek. Umieścić probówki z roztworem lizującym 3M w pustym stojaku.

4.2 Aby uniknąć zanieczyszczeń krzyżowych, należy otwierać taśmy z probówkami z roztworem lizującym

3M pojedynczo i na każdym etapie przenoszenia stosować nową końcówkę pipety.

4.3 Przednamnożoną próbkę należy przenieść do probówek z roztworem lizującym 3M w opisany poniżej sposób:

Najpierw przenieść każdą przednamnożoną próbkę do pojedynczej probówki z roztworem lizującym 3M.

Na końcu przenieść NC.

4.4 Do zdejmowania korków taśmy z probówkami z roztworem lizującym 3M (po jednej taśmie na raz) należy

wykorzystać Narzędzie 3M™ do zakładania/zdejmowania korków probówek do diagnostyki molekularnej – Liza.

4.5 Zdjąć korek probówki z roztworem lizującym 3M – jeśli lizat będzie zachowany do celów ponownego wykonania

testu, umieścić korki w czystym pojemniku do ponownego założenia po wykonaniu lizy.

4.5.1 Odnośnie postępowania z lizatem patrz Załącznik A.

4.6 W przypadku lepkich próbek przed pobraniem próbki od strony przeltrowanej wymieszać torbę

do przednamnażania.

4.7 Przenieść 20 µl próbki do probówki z roztworem lizującym 3M, jeśli nie określono inaczej w tabeli z protokołami

(przykładowy protokół 5 oraz przednamnażanie dodatkowe w RVS lub w przypadku stosowania próbek

środowiskowych z buforem neutralizującym).

(Polski)

PL

11

20 µl

5. Powtarzać kroki od 4.4 do 4.7 do momentu dodania każdej indywidualnej próbki do odpowiedniej probówki

z roztworem lizującym 3M w taśmie.

6. Po przeniesieniu wszystkich próbek przenieść 20 µl NC (jałowe podłoże przednamnażające, np. BPW) do probówki

z roztworem lizującym 3M. Nie stosować wody jako NC.

7. Upewnić się, że temperatura Wkładki 3M bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej wynosi 100 ± 1°C.

8. Umieścić odkryty stojak na probówki z roztworem lizującym 3M we Wkładce 3M bloku grzewczego do diagnostyki

molekularnej i ogrzewać przez 15 ± 1 min. Podczas ogrzewania roztwór lizujący 3M zmieni barwę z różowej (chłodny)

na żółtą (gorący).

8.1. Próbki, które nie przeszły odpowiedniej obróbki cieplnej na etapie lizy, można uznać za potencjalne zagrożenie

biologiczne i NIE należy ich umieszczać w Urządzeniu 3M do diagnostyki molekularnej.

9. Wyjąć odkryty stojak z probówkami z roztworem lizującym 3M z bloku grzewczego i umożliwić schłodzenie we

Wkładce 3M bloku chłodzenia do diagnostyki molekularnej przez co najmniej 5 minut, a maksymalnie 10 minut.

Wkładka 3M bloku chłodzenia do diagnostyki molekularnej, stosowana w temperaturze otoczenia, powinna

znajdować się bezpośrednio na stole laboratoryjnym. Po schłodzeniu roztwór lizujący ponownie przybierze

różową barwę.

10. Wyjąć stojak z probówkami z roztworem lizującym 3M z Wkładki 3M bloku chłodzenia do diagnostyki molekularnej.

00:15:00

99-101ºC

20-25ºC

00:05:00

Amplikacja

1. Dla każdej próbki oraz NC wymagana jest jedna probówka reagentowa Molekularnego testu 3M do wykrywania

2 – Salmonella.

1.1 Taśmy z probówkami można dociąć do pożądanej liczby probówek. Dobrać wymaganą liczbę pojedynczych

probówek reagentowych Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella lub taśm złożonych

z 8 probówek.

1.2 Probówki reagentowe należy umieścić na pustym stojaku.

1.3 Nie wolno dopuścić do wstrząśnięcia granulek reagentowych na dnie probówek.

2. Wybrać jedną probówkę Kontroli reagenta i umieścić ją w stojaku.

3. Aby uniknąć zanieczyszczeń krzyżowych, należy otwierać taśmy z probówkami reagentowymi pojedynczo i na każdym

etapie przenoszenia stosować nową końcówkę pipety.

4. Przenieść poszczególne lizaty do probówki reagentowej Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella oraz

do probówki Kontroli 3M reagenta w sposób opisany poniżej:

Najpierw przenieść poszczególne próbki lizatu do osobnych probówek reagentowych, a następnie przenieść próbkę

NC. Na końcu nawodnić probówkę Kontroli 3M reagenta.

5. Do zdejmowania korków probówek reagentowych Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella należy

wykorzystać Narzędzie 3M™ do zakładania/zdejmowania korków probówek do diagnostyki molekularnej – Reagent,

po jednej taśmie na raz. Wyrzucić korek.

5.1 Przenieść 20 µl próbki lizatu z górnej 1/2 płynu (unikać osadu) w probówce z roztworem lizującym 3M do

odpowiedniej probówki reagentowej Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella. Pipetować pod

kątem, aby nie dopuścić do wstrząśnięcia granulek. Delikatnie wymieszać, pobierając i wypuszczając roztwór

pipetą 5 razy.

(Polski)

PL

12

5.2 Powtarzać krok 5.1, aż wszystkie pojedyncze próbki lizatu zostaną dodane do odpowiednich probówek

reagentowych Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella znajdujących się w taśmie.

5.3 Probówki reagentowe Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella należy zamknąć załączonymi

dodatkowymi korkami i za pomocą zaokrąglonej strony Narzędzia 3M do zakładania/zdejmowania korków

probówek do diagnostyki molekularnej – Reagent wywołać nacisk ruchem w przód i w tył, aby upewnić się,

że korek został szczelnie nałożony.

5.4 Kroki od 5.1 do 5.3 należy powtarzać zależnie od potrzeby dla wszystkich próbek poddawanych badaniu.

5.5 Po przeniesieniu wszystkich próbek lizatu powtórzyć kroki od 5.1 do 5.3, aby przenieść 20 µl lizatu NC do

probówki reagentowej Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella.

5.6 Przenieść 20 µl lizatu NC do probówki Kontroli 3M reagenta. Pipetować pod kątem, aby nie dopuścić do

wstrząśnięcia granulek. Delikatnie wymieszać, pobierając i wypuszczając roztwór pipetą 5 razy.

6. Zamknięte korkiem probówki należy umieścić na czystej i odkażonej tacy 3M urządzenia szybkiego ładowania testów

do diagnostyki molekularnej. Zamknąć i zablokować pokrywę tacy 3M urządzenia szybkiego ładowania testów do

diagnostyki molekularnej.

20 µL

7. W oprogramowaniu 3M do diagnostyki molekularnej sprawdzić i potwierdzić kongurację analizy.

8. Kliknąć przycisk Start w programie i wybrać używane urządzenie. Nastąpi automatyczne otwarcie pokrywy

wybranego urządzenia.

9. Aby rozpocząć analizę, należy umieścić Tacę 3M urządzenia szybkiego ładowania testów do diagnostyki molekularnej

w Urządzeniu 3M do diagnostyki molekularnej i zamknąć pokrywę. Na wyniki trzeba poczekać 60 minut, choć wyniki

dodatnie można uzyskać wcześniej.

10. Po zakończeniu testu należy wyjąć Tacę 3M urządzenia szybkiego ładowania testów do diagnostyki molekularnej

z Urządzenia 3M do diagnostyki molekularnej i zutylizować probówki, namaczając je w 1–5% (obj./obj., wodnym)

roztworze domowego wybielacza przez 1 godzinę i usuwając z obszaru przygotowywania testów.

WAŻNA INFORMACJA: Aby zminimalizować ryzyko otrzymania wyników fałszywie dodatnich w związku

z zanieczyszczeniem krzyżowym, nie należy otwierać probówek reagentowych zawierających DNA po amplikacji.

Dotyczy to probówek reagentowych Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella, probówek Kontroli

3M reagenta, probówek reagentowych oraz probówek Kontroli 3M macierzy. Zanieczyszczone uszczelnione probówki

reagentowe należy utylizować, namaczając je w 1–5% (obj./obj.; wodnym) roztworze domowego wybielacza przez

1 godzinę i wynosząc poza obszar przygotowania testów.

Wyniki i interpretacja

Algorytm interpretuje krzywą strumienia świetlnego powstałego w wyniku wykrycia amplikacji kwasu nukleinowego.

Oprogramowanie prowadzi automatyczną analizę wyników oraz koduje je odpowiednimi kolorami. Wynik dodatni lub

ujemny określa się przez analizę wielu określonych niepowtarzalnych parametrów krzywej. Domniemane wyniki dodatnie

przekazuje się w czasie rzeczywistym, natomiast wyniki ujemne wyświetlą się po zakończeniu testu.

Domniemane wyniki dodatnie próbek należy potwierdzić zgodnie ze standardowymi procedurami operacyjnymi

laboratorium lub stosując odpowiednią referencyjną metodę potwierdzającą

(1,2,3)

, rozpoczynając od transferu z głównego

podłoża przednamnażającego 3M BPW wg ISO do drugorzędowych bulionów przednamnażających, a następnie izolując

i potwierdzając izolaty za pomocą stosownych metod biochemicznych i serologicznych.

UWAGA: Nawet próbka ujemna nie da odczytu zerowego, ponieważ system i odczynniki do amplikacji Molekularnego

testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella charakteryzują się swoistym poziomem tła w RLU.

W rzadkich przypadkach, przy wystąpieniu nietypowego strumienia światła wychodzącego, algorytm opisze je jako

„Sprawdzić”. Firma 3M zaleca powtórzenie testów dla wszystkich próbek oznaczonych jako „Sprawdzić”. Jeżeli utrzymuje

się wynik „Sprawdzić”, należy przejść do testu potwierdzającego z zastosowaniem preferowanej metody lub zgodnie

z lokalnymi przepisami.

(Polski)

PL

13

Typ

studzienki

Symbol wyniku

dla studzienki

Wynik Interpretacja wyników

Próbka

Dodatni

Domniemanie wyniku dodatniego próbki pod kątem

docelowego patogenu.

Próbka

Ujemny Wynik ujemny próbki pod kątem docelowego patogenu.

Próbka

Blokada

Macierz próbki była niedostępna dla testu. Konieczne może

być powtórzenie testu. Więcej informacji można znaleźć

w części Rozwiązywanie problemów oraz w Informacjach

o produkcie.

Próbka Sprawdzić

Brak możliwości oznaczenia obecności lub braku patogenu

docelowego. Konieczne może być powtórzenie testu. Więcej

informacji można znaleźć w części Rozwiązywanie problemów

oraz w Informacjach o produkcie.

Próbka

Błąd

Nie wykryto bioluminescencji. Konieczne może być

powtórzenie testu. Więcej informacji można znaleźć w części

Rozwiązywanie problemów oraz w Informacjach o produkcie.

Potwierdzenie wyników zgodnie z certykowaną metodą NF VALIDATION

W kontekście walidacji NF VALIDATION wszystkie próbki określone jako dodatnie w badaniu Molekularnym testem 3M do

wykrywania 2 – Salmonella należy potwierdzić, wykonując jeden z następujących testów:

Opcja 1: Zastosowanie normy ISO 6579

(3)

, począwszy od podłoża przednamnażającego w postaci buforowanej

wody peptonowej

(3)

.

Opcja 2: Wdrożenie metody potwierdzającej, która polega na wykonaniu następujących czynności: Przenieść 0,1 ml

podłoża przednamnażającego BPW wg ISO

(3)

lub tetrationianowych bulionów przednamnażających (próbki produkcji

pierwotnej) do 10 ml bulionu RVS. Inkubować przez 24 ± 3 godziny w temperaturze 41,5°C. Umieścić na agarze XLD

(ksyloza, lizyna, deoksycholan)

(3)

lub na agarze chromogenicznym specycznym dla bakterii Salmonella. Wykonać

aglutynację lateksową za pomocą testu lateksowego Oxoid Salmonella bezpośrednio na wyizolowanych koloniach.

Opcja 3: Wykorzystanie sond kwasu nukleinowego w sposób opisany w normie EN ISO 7218

(5)

zastosowanych na

wyizolowanych koloniach z agaru XLD lub chromatycznego (patrz opcja 1 lub 2). Tego badania nie można wykonywać za

pomocą Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella.

Opcja 4: Zastosowanie innej metody zgodnie z certykatem NF VALIDATION, której zasada musi się różnić od

Molekularnego testu 3M do wykrywania 2 – Salmonella. Należy stosować kompletny protokół opisany dla tej drugiej

metody poddanej walidacji. Wszystkie kroki poprzedzające rozpoczęcie potwierdzania muszą być wspólne dla obu metod.

W przypadku niezgodności wyników (domniemany wynik dodatni w badaniu Molekularnym testem 3M do wykrywania

2 – Salmonella, brak potwierdzenia jedną z powyższych metod, a w szczególności w przypadku testu aglutynacji

lateksowej) laboratorium musi wykonać czynności niezbędne do zapewnienia ważności uzyskanych wyników.

W przypadku pytań dotyczących konkretnych zastosowań lub procedur należy odwiedzić stronę

www.3M.com/foodsafety lub skontaktować się z lokalnym przedstawicielem lub dystrybutorem rmy 3M.

Załącznik A. Przerwanie protokołu: Przechowywanie i ponowne badanie lizatów poddanych

obróbce cieplnej

1. W celu przechowywania lizatu poddanego obróbce termicznej należy ponownie zamknąć probówkę lizatu czystym

korkiem (patrz część Liza, punkt 4.5).

2. Przechowywać w temp. od 4 do 8°C maksymalnie przez 72 godziny.

3. Przygotować przechowywaną próbkę do amplikacji przez odwrócenie 2–3 razy w celu zmieszania.

4. Otworzyć probówki.

5. Umieścić mieszane probówki lizatu we Wkładce 3M bloku grzewczego do diagnostyki molekularnej i ogrzewać

w temp. 100 ± 1°C przez 5 ± 1 min.

6. Wyjąć stojak z probówkami z roztworem lizującym 3M z bloku grzewczego i umożliwić schłodzenie we Wkładce

3M bloku chłodzenia do diagnostyki molekularnej przez co najmniej 5 minut, a maksymalnie 10 minut.

7. Kontynuować protokół od etapu Amplikacji wyszczególnionego powyżej.

Strona jest ładowana ...

3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella MDA2SAL96, 96 tests, 1 ea Instrukcja obsługi

3M Molecular Detection Assay 2 - Salmonella MDA2SAL96, 96 tests, 1 ea Instrukcja obsługi

w innych językach

Powiązane dokumenty

Inne dokumenty